FABRICANTE DE KITS PARA PURIFICACIÓN DE ARN LÍDER EN EL MERCAD | Salida noviolenta
FABRICANTE DE KITS PARA PURIFICACIÓN DE ARN LÍDER EN EL MERCADO AFIRMA QUE NO CONOCEN NINGÚN KIT QUE AISLE VIRUS
A través de emails, me puse en contacto con el fabricante para decirle que quería reproducir el experimento de aislamiento del SARS-Cov-2 de este estudio publicado en la revista Biomédica el 15/10/2020:
Aislamiento y caracterización de una cepa temprana de SARS-CoV-2 durante la epidemia de 2020 en Medellín, Colombia
https://revistabiomedica.org/index.php/biomedica/article/view/5834/4733#content/citation_reference_13
Les dije que me gustaría saber si tenían el kit que permite aislar el SARS-Cov-2, que quería que el resultado final fuera virus completos de SARS-CoV-2 únicamente. No me valía que hubiera ningún otro ARN de cualquier otra cosa. Y que solo fuera de SARS-CoV-2 que es lo que entendemos que es el aislamiento.
Respuesta del fabricante:
Desconozco la tecnología del kit que comentas, nosotros no tenemos nada similar, y no conozco la forma de discriminar dos ARN de diferentes virus durante la extracción, ni tampoco lo he encontrado en el paper que me adjuntabas.
Lo que se está utilizando para el diagnóstico de SARS-CoV-2 es la extracción de ARN viral de fluídos libres de células, seguido de la amplificación por RT-qPCR utilizando primers y sondas específicas dirigidas al menos a dos regiones diferentes del virus. Es por ello que se hacen ensayos multiplexados con diferentes fluoróforos, de forma que cada uno se dirige a una parte del genoma.
Por ejemplo, en los protocolos de la CDC se dirigen a la amplificación simultánea de dos regiones altamente conservadas del gen N (N1 y N2), cuyas secuencias te indico debajo. Es de esta manera como se está haciendo el diagnóstico hasta ahora en España.
2019-nCoV_N1-F 5’-GAC CCC AAA ATC AGC GAA AT-3’
2019-nCoV_N1-R 5’-TCT GGT TAC TGC CAG TTG AAT CTG-3’
2019-nCoV_N1-P 5’-YY-ACC CCG CAT TAC GTT TGG TGG ACC-BHQ1-3’
2019-nCoV_N2-F 5’-TTA CAA ACA TTG GCC GCA AA-3’
2019-nCoV_N2-R 5’-GCG CGA CAT TCC GAA GAA-3’
2019-nCoV_N2-P 5’-FAM-ACA ATT TGC CCC CAG CGC TTC AG-BHQ1-3’
Siento no poder ser de más ayuda, pero no tenemos ningún kit para eliminar el ARN viral que no sea de SARS-CoV-2.
